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Wysłany: Pią 23:59, 25 Mar 2011 |
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快速石蜡切片法在活检组织及免疫组化中的应用
体在肾小球肾炎的发病过程中对肾组织的直接破坏作用。它在人类肾小球疾病中的破坏作用已成为近年来研究的重要课题。我ff]iN免疫荧光法检测了40例各种肾小球疾病i蜡组织内攻膜复合体的分布。发现在同一种病理类型的肾小球肾炎中,儿是有攻膜复合体存在的,病情较重临床上表现为反复的:病综合征,血尿、持久蛋白尿。相反在肾组织中没有攻膜复合体沉积的患者,病情相对缓和,治疗效果比较满意。在硬化的肾小球内可见攻膜合体的存在,提示活化的补体可能是导致病变的肾小球向硬化的终末期发展的一个重要因素。但也有人观察到在肾脏疾病的末期,攻膜复合体不再起作用。(1990―04―03收稿)快速石蜡切片法在活检组织及免疫组化中的应用林国宏陈蕴萍于安民朱辉(基础医学部病理解剖学教研室)关键词快速石蜡切片;病理诊断;免疫组化石蜡切片是一种常规的制片方法,完成此过程一般需2天的时间。因此,影响临床尽快的确诊疾病,对患者也甚为不便。为解决这一问题,我们近年来开展了一种快速石蜡切片技术,特别适用于临床活检,在2h内即可出片,具体步骤如下l1材料与方法,。整个过程需在水浴锅上完成。吴楠(鞍山三冶职工医院病理科)(1)先将水浴锅调温至60。C~70。C备用;(2)组织取材,大小不限,厚度在0.1cm~0.3cm以内;(3)将取好的活检组织放入三角烧瓶,加入15~20倍的lO%L}J醛溶液,在酒精灯上加温5min~15min(以不沸腾起泡为宜),(4)将活检组织取出放入无水乙醇中10min~25minj(5)移入丙酮中5min;(6)二甲苯透明(以组织透明为准);.(7)浸蜡1Omin~20min;’(常规包埋、切片;(9)将切片放水浴锅上烘烤数分钟(蜡化为止);(10)脱蜡脱苯、水洗;(11)苏木素染色,在酒精灯上适度加温,然后分化、返蓝、在数秒钟内完成;(12)伊红染色,加温数秒钟,水洗;(13)逐级脱水、透明、封片。2讨论实践证明,此方法麓便、速度快只要掌握时间得当,做出的切片对临床诊断无影响,经光镜观察及与常规石蜡切片相比较并无细胞收缩不当的情况。我们在实践当中观察到各种不同的活检组织在做快速石蜡切片的过程中,所用时间并不是千附表快速石腊切片法在各种组织材料的固定、脱水浸蜡所需时间(min)步骤(肠、曩颈)妇科乳淋巴脂尖锐湿疣腺组织肪固定51051010~1510脱水15l515202520浸蜡10101020253u‘Z33‘._:篇律盼‘而是差异很大,我们仅以我们所做的4oo例不同临床洁检组织材料的体‘会列表,说明各种组织以最短时间作出满意切片I慵数+(附表)。;.、综上所述,快速石蜡切片法是一种实用可行的技术方法,值得推广。它可针对各种不同的组织做特殊的时间处理,某种程度上优于在脱水筐内固定同步脱水、透明的组织材料。常规石蜡切片在免疫组化中已大量应用,对于快速石蜡切片能否影响组化染色这一问题我们臌了进一步的观察:随机取快速石蜡切片的蜡块,淋巴结2块(两例),平滑肌瘤2块(两例);取常规的石蜡切片的蜡块,淋巴结2块(2例),平滑肌瘤2块(两例)为阳性对照。将各例的蜡块切成4vm厚切片,脱蜡后,按常规的Al3C方法进行组化染色,DAB显色,染平滑肌以Desmin作为第一抗体,染淋巴结以白细胞共同抗原作为第一抗体。染色结果在平滑肌纤维显示Desmin阳性,淋巴结的单个核细胞显示白细胞共同抗原为阳性,二者的阳性显色范围和受色深成与对照切片相似。结果证实,正确掌握快速石蜡切片法所做出的切片,无论对一般石蜡诊断及免疫组化(至少部分材料)观察均收到良好的效果。故值得推广。(19900922收稿)
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