同种异体淋

vzeucvprjfe · Wysłany: Pon 2:24, 14 Mar 2011

同种异体淋巴细胞与黑素细胞混合培养的实验研究
见I期、Ⅱ期的黑素小体．在胞浆周边0f见已黑素化的Ⅲ期、Ⅳ期黑素小体。在伸出的树突里可见成熟的Ⅳ期黑素小体排列在树突的两侧．输送至树突的顶端(图1j将异体正常人外周血提取的单一核细胞与体外培养的黑素细胞共同培养72h后，观察黑素细胞的形态和结构功能情况显示，黑素细胞的形态正常，细胞完整无损伤，黑索化的Ⅲ期、Ⅳ期黑素小体规则地分布于胞体的边缘和树突，细胞核周围多为未黑素化的I期、Ⅱ期黑素小体。细胞内线粒体丰富．粗面内质网附近有不同阶段的黑素小体(图2)。将白癜风患者外周血中提取的单一棱细胞与体外培养的正常人黑素细胞共同培养72h后，观察黑素细胞的超微结构显示，黑素细胞的胞体和树突完整，黑素化的Ⅲ期、Ⅳ期黑素小体规则地分布于胞体的边缘和树突，细胞胞浆内可见不同阶段的黑素小体：细胞内细胞器丰富，可见大量的线粒体和粗面内质网。各临床类型未见明显差异。移植治疗白癜风有表皮移植和黑素细胞移植。目前，国内主要采用自体表皮移植治疗，国外已普遍开展自体黑素细胞培养移植治疗。但是自体移植存在着供皮问题，前者只能治疗与供皮区同样大小的区域，后者虽经培养后可大大增加黑素细胞的数量．但取皮区留下瘢痕让患者难以接受。此外，白癜风患者的黑素细胞遗传缺陷．使得部分自体移植治疗失败。由此．我们希望通过异体黑素细胞培养移植治疗白癜风在移植反应中，HLA—I类抗原和H1．g．一Ⅱ类抗原均起作用，但主要是Ⅱ类抗原，尤其是HLA—DR抗原，在抗原识别时起作用I。在动物中，含有朗格汉斯细胞的表皮，可诱导强烈的同种异体T细胞反应若事先用Ia抗体加补体处理供鼠的刺激细胞，以除去带Ⅱ类抗原的细胞唇，体外混合淋巴细胞反应中的增殖反应和杀伤效应都明显减弱或消失同样在人类的表皮淋巴细胞混合反应中．可预先用抗HLA—DR血清或DR、OKT6单克隆抗体(MCA)处理。应用单克隆抗体后，同种异体反应的细胞毒T淋巴细胞明显减少或几乎无反应因此，Faure等I认为在表皮细胞淋巴细胞混合反应中，产生细胞毒T淋巴细胞的条件是，人类表皮细胞中必须含有表达HLA一Ⅱ抗原的细胞。以往．在烧伤患者中进行表皮移植后产生排异反应，可能与移植的表皮中含有HIA—DR抗原有关I。现随着黑素细胞纯培养的成功与成熟，及本实验的初步结果，提示纯黑素细胞的异体移植存在着一定的可能性本文观察体外培养正常人黑素细胞与同种异体的淋巴细胞混合后．黑素细胞对淋巴细胞的促转化、增殖作用与ConA刺激淋巴细胞转化、增殖的阳性对照比较，黑素细胞的促淋巴细胞转化、增殖的特异性抗原作用较弱：进一步比较黑素细胞对不同病期的白癜风患者淋巴细胞的影响，发现黑素细胞对进展期白癜风患者淋巴细胞的刺激作用相对较强，而稳定期患者和正常人对照组差异无显著性。因而，在进行同种异体移植时最好选择稳定期患者基于正常人黑素细胞体外纯培养系统成功建立，以及白癜风患者淋巴细胞转化试验、E花环试验、结核菌素试验与植物血凝素皮肤试验等均反应低下，表明有细胞免疫异常，可能有利于异体黑素细胞的移植综上所述，同种异体的淋巴细胞对黑素细胞无明显损伤，黑素细胞经处理后，黑素台成功能正常一细胞的形态完整，胞体和树突无损伤细胞内细胞器丰富，与黑素合成有关的细胞器如线粒体、粗面内质网丰富，胞浆内可见大量的不同阶段黑素小体在高尔基复台体的囊泡周围可见许多I期黑素小体．提示黑素小体来源于高尔基复合体的囊泡将白癜风患者外周血单一核细胞处理过的黑索细胞与空白对照和正常人对照相比，无明显差异。
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