软骨细胞上

vzeucvprjfe · Wysłany: Śro 1:40, 02 Mar 2011

软骨细胞上清液诱导BMSC向软骨细胞转化的实验研究
能够在极少量软骨细胞提供的软骨微环境下分化为软骨细胞用于构建软骨组织。为了进一步明确软骨细胞诱导BMSC成软骨分化的可能基质，在以上实验的基础上，我们单纯采用培养软骨细胞的上605清液诱导BMSC向软骨细胞转化。诱导3d时部分细胞逐渐由成纤维样细胞变为宽广扁平的多边角形细胞。7d后取出标本进行甲苯胺蓝染色和Masson染色，结果分别出现蓝染和绿染的阳性细胞，提示诱导后细胞分泌软骨细胞特异性蛋白。ColI1免疫组化显示细胞分泌基质中也含有大量软骨细胞表达的ColⅡ成分。部分细胞染色未出现阳性，可能与诱导时间有关。可初步推断，诱导7d后，BMSC已分化为软骨细胞。但是，单纯形态学的指标还不足以确定是否为软骨细胞。因此，我们又采用了RT—PCR来检测诱导前后细胞内ColI1和aggrecanmRNA表达。结果发现诱导组的ColI1和aggrecanmRNA表达阳性。而对照组则为阴性。进一步证实了诱导后的BMSC已向软骨细胞转化。综上所述，软骨细胞微环境对BMSC向软骨细胞转化具有极强的诱导作用，其中软骨细胞分泌基质所起作用至关重要。如果可以从分子水平做进一步深入研究，找出诱导的关键因素并提纯出来，这对BMSC向软骨细胞分化的相关研究将起到积极的促进作用。
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